我们团队既往研究证实，内皮祖细胞（EPCs）与烟雾病（MMD）患者脑硬膜动脉血管融通（EDAS）手术后侧枝循环血管网络的形成显著相关；即患者外周血EPCs含量越高，术后血流重建效果越好。高同型半胱氨酸血症（HHcy）可以通过影响EPCs的增殖、迁移、粘附和体外血管生成等功能来减少EPCs的数量。此外，同型半胱氨酸（Hcy）通过激活烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶刺激EPCs内活性氧的产生，从而增加EPCs的凋亡水平。先前的一项全基因组关联研究（GWAS）发现，RNF 213和MTHFR等基因的多态性与MMD的发病率相关。MTHFR是Hcy代谢途径中的一个关键酶，可以将Hcy再甲基化为蛋氨酸。目前已经有研究证实，MTHFR基因多态性携带者的血浆Hcy水平升高。我们推测MTHFR基因可能通过调节Hcy水平影响外周血EPCs的数量，从而决定EDAS术后侧枝循环形成的影响。

因此，我们设计了一项前瞻性观察研究，旨在通过探讨与MTHFR相关的Hcy水平与EPCs之间的相关性，来确定MTHFR与EDAS手术结果之间是否存在相关性，并确定该生物标志物是否可以预测EDAS后侧枝循环的形成。

研究对象118例患者中，rs9651118位点TT基因型（野生型）53例（44.9%），TC基因型（杂合突变）33例（28.0%），CC基因型（纯合突变）32例（27.1%）。（表1）

rs9651118位点TT基因型的平均发病年龄为22.6±16.6岁，TC基因型的平均发病年龄为25.3±17.1岁，CC基因型的平均发病年龄为32.2±17.3岁，该位点存在基因突变的患者发病年龄更大（P=0.001）。TT基因型患者中女性的比例明显高于CC基因型和TC基因型患者（P=0.026）。CC基因型患者侧枝循环分级明显优于TC基因型和TT基因型患者（P<0.001）。TT基因型患者血清Hcy水平为13.4±9.5μmol/L,TC基因型患者血清Hcy水平为9.812±3.183μmol/L,CC基因型患者血清Hcy水平为8.9±2.9μmol/L（P<0.001），表明在rs9651118基因位点突变的情况下，患者体内Hcy水平逐渐降低。TT基因型患者静脉血EPCs含量为0.039±0.016,TC基因型患者静脉血EPCs含量为0.088±0.061,CC基因型患者静脉血EPCs含量为0.103±0.062（P<0.001），表明rs9651118位点突变后，静脉血EPCs含量增加。同时，三种基因型在初始症状、后循环受累和铃木分期方面没有差异。（表2）

所有患者在完成双侧EDAS后6个月DSA复查结果显示，236个大脑半球中有168个侧枝循环形成良好（松岛分级A级或B级），236个大脑半球中有68个侧枝循环形成不良（松岛分级C级）。rs9651118基因位点突变有利于EDAS术后侧枝循环血管形成（P<0.001），但杂合突变和纯合突变之间没有差异。值得注意的是，术后侧枝循环良好组患者血清Hcy水平明显低于术后侧枝循环不良组的患者（9.1±3.4 vs 16.3±10.3；P<0.001）。术后侧枝循环良好组外周血EPCs含量显著高于术后侧枝循环不良组（0.085±0.057 vs 0.034±0.016；P<0.001）。（表3）

Fig. 1 Evaluation of a patient with the rs9651118 CC genotype and a venous blood Hcy level of 6.3 mmol/L

A: Flow cytometry analysis shows an EPC percentage of 0.099% in peripheral blood. B and C: The bilateral internal carotid angiograms （lateral views） before EDAS. D and E: An excellent collateral circulation induced by EDAS （Matsushima grade A） is obtained in both hemispheres after 6 months.