CNS恶性肿瘤的治疗具有挑战性。尽管在手术方法、放化疗和靶向治疗方面取得了进展，但大多数集中的恶性肿瘤，包括神经胶质瘤、外周肿瘤脑转移和CNS淋巴瘤，预后仍然很差。阻碍颅内肿瘤治疗的一个关键因素是血脑屏障（BBB），它阻止了绝大多数治疗药物进入大脑。NEO100是一种高纯度的紫苏醇（POH），一种天然的植物单萜，是柠檬烯的代谢物它可以在各种植物精油中找到，包括柑橘类水果、薄荷、绿薄荷、樱桃、蔓越莓、鼠尾草、柠檬草、薰衣草、芹菜籽等。基于POH的两亲性，我们推测NEO100可能会影响血脑屏障的完整性，当通过IA注入时，可能会触发血脑屏障打开。在我们之前的临床前研究中，我们成功地验证了这一现象。我们发现IA NEO100破坏了脑内皮细胞血脑屏障的紧密连接，并导致紧密连接蛋白从细胞表面转移到细胞浆中。此外，NEO100影响了血脑屏障的跨细胞和细胞旁转运途径，导致静脉输注的小分子化疗药物（如甲氨蝶呤、阿霉素）以及更大的分子，如曲妥珠单抗和免疫检查点抑制抗体进入大脑的增加。这种血脑屏障的开放作用，是安全、可控、可逆的，并在脑恶性肿瘤小鼠模型中显著提高了曲妥珠单抗和免疫检查点抑制剂的治疗活性。

嵌合抗原受体（CAR）T细胞已经成为对抗癌症的一种有效的新武器，但当涉及到位于血脑屏障内的靶点时，它们的治疗效果就会减弱。这些局限性促使我们研究IA NEO100打开血脑屏障是否会改善循环CAR-T细胞进入大脑，从而可能获得更好的治疗结果。为了达到这个目的，我们使用了一个小鼠中枢神经系统淋巴瘤模型，该模型是通过在颅内植入人类Raji淋巴瘤细胞而产生的。实验中先对小鼠用IA NEO100打开血脑屏障，然后静脉注射CD19靶向的CAR-T细胞，实验结果表明这种方法可以使小鼠接近100%存活。

总的来说，这些结果表明正常小鼠在短期内对这一过程的耐受性相当好，但是CAR-T细胞并没有在大脑中明显积累，则说明在没有肿瘤的情况下，当NEO100打开血脑屏障后，靶向抗体不会在正常脑组织中积累。

图3：小鼠中枢神经系统淋巴瘤的建立。Raji b细胞淋巴瘤异种移植的生物发光成像（BLI）揭示了发光与颅内注射不同细胞的相关性。A：将增强的表达GFP/luc的Raji B细胞立体植入NSG（NOD scid）小鼠右半球。10天后，BLI证实肿瘤存在。左图为2×10⁵细胞植入后，右图为5×10⁵细胞植入后，瘤体大小不一，橙色/红色表示强肿瘤信号。B：将四组荷瘤小鼠按图2的图示（在此相应标注）进行处理，24小时后对脑切片进行免疫组化染色，检测抗人CD3抗体。箭头指向CAR-T细胞，当IV CAR-T细胞之前有IA NEO100（比例尺=50μm）出现更多。

图5：中枢神经系统淋巴瘤小鼠的生存情况。将Raji-eGFP/Luc细胞植入小鼠大脑，第5天的生物荧光成像证实了类似的肿瘤摄取。在同一天，动物被分成治疗组，接受单次IV注射CD19 CAR-T细胞，有或没有预先用IA NEO100打开BBB。其中一组作为对照组，不接受治疗。A：监测动物生存情况，用Kaplan-Meier生存图表示。B：肿瘤的发展用反复的生物荧光成像记录，头部区域的蓝/红颜色表示肿瘤的存在，图中空白表示该动物死于疾病，不能再进行成像。C-E：三组治疗动物的体重随时间变化。每一行代表一个小鼠，一条中断的生产线反映了相应动物的死亡，红色箭头表示第5天的单一干预。

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